Pitkien puukkojen yöllä tarkoitetaan puhdistusta, jolla Adolf Hitler hankkiutui eroon vastustajistaan natsiliikkeessä vuonna 1934.
Hitleristä oli tullut Saksan kansleri edellisvuonna, mutta natsien joukossa oli ryhmittymiä, joista jotkut suhtautuivat erittäin epäilevästi Hitleriin ja hänen lähimpään johtoonsa.
Hitler uskoi, että esimerkiksi puolisotilaallisessa Sturmabteilung (SA) -organisaatiossa moni johtohahmo hautoi sosialistista vallankumousta.
Pitkien puukkojen yö alkoi 30. kesäkuuta 1934, kun Hitlerin henkivartiokaartikseen perustamat puolisotilaalliset SS-joukot ja salainen poliisi Gestapo teloittivat useita SA:n jäseniä, kuten sen johtajan Ernst Röhmin, sekä lukuisia sosiaalidemokraatteja ja Hitlerin poliittisia kilpailijoita, kuten entisen valtakunnankanslerin Kurt von Schleicherin.
Useita päiviä kestänyt operaatio oli huolellisesti suunniteltu ja toteutettu.
Varmuudella tunnetaan 85 uhrin nimet, mutta mitä ilmeisimmin heidän todellinen kokonaismääränsä oli paljon suurempi, todennäköisesti lähes kaksisataa henkeä.
Pitkien puukkojen yö poisti epäilijät Hitlerin omista riveistä ja pelästytti poliittiset kilpailijat hiljaisiksi.
Siten kaikki valta keskittyi Hitlerille ja tie aukesi natsien yksinvallalle.